尿素氮測試盒

微量法100T/96S

注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

尿素是生物體內含氮化合物分解的終產物，在尿酶催化下分解轉化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。

測定原理

樣本中尿素氮在氯化高鐵一磷酸溶液中與二乙酰一肟和硫胺脲共煮，生成一種紅色的二嗪化合物，其顏色的深淺與尿素氮含量成正比，采用二乙酰一肟法測定尿素氮含量。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制    

試劑一：液體6mL×1瓶，4℃避光保存，

試劑二：液體60mL×1瓶，4℃避光保存。

樣品處理

組織：按照質量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，勻漿后于25℃，10000g離心10min，取上清待測。

細胞：按照細胞數量（104個）：蒸餾水體積（mL ）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL蒸餾水），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測。

血清或其它液體：直接檢測。

測定操作

混勻，沸水浴10min，冷卻后，540nm下測定吸光值。△A=A測定-A空白。空白管只要做一管。

尿素氮含量計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定回歸方程為y =2.048x + 0.0229，R2 = 0.9943；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。

1、按照血清（漿）或者細胞培養液體積計算

尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷2.048=0.4882×(△A-0.0229)

2、按照樣本質量計算

尿素氮含量mg/g鮮重)= (△A-0.0229)÷2.048×V樣總÷W=0.4882×(△A-0.0229)÷W

3、按照蛋白濃度計算

尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(△A-0.0229) ÷Cpr

V樣總：加入提取液體積，1 mL； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；

b.用96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定回歸方程為y = 1.024x + 0.0229，R2 = 0.9943； x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。

1、按照血清（漿）或者細胞培養液體積計算

尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷1.024=0.9766×(△A-0.0229)

2、按照樣本質量計算

尿素氮含量(mg/g鮮重)= (△A-0.0229)÷1.024×V樣總÷W=0.9766×(△A-0.0229)÷W

3、按照蛋白濃度計算

尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.9776×(△A-0.0229) ÷Cpr

V樣總：加入提取液體積，1 mL； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或細胞總數，500萬。

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國內試劑耗材經銷代理。

2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。

4. 進出口貨物代理服務。

5. 公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質量保證，所有產品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。公司整合國際與國內資源，加強網絡建設，提高公司內部運作效率，為客戶提供方便、快捷的服務。

7. 公司突出創新思維，提高工作效能，減低運作成本，為客戶提供優惠的價格。

尿素氮測試盒